中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所邢福國獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所申請的專利全細胞生物傳感器陣列及其應(yīng)用獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN116106543B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-09-09發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202310060984.1,技術(shù)領(lǐng)域涉及:G01N33/543;該發(fā)明授權(quán)全細胞生物傳感器陣列及其應(yīng)用是由邢福國;馬俊寧;管樂設(shè)計研發(fā)完成,并于2023-01-17向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本全細胞生物傳感器陣列及其應(yīng)用在說明書摘要公布了:本發(fā)明公開了一種全細胞生物傳感器陣列,包括96孔板,96孔板上放置有14種全細胞生物傳感器,每種全細胞生物傳感器的數(shù)量為3?4個,每種全細胞生物傳感器包括:宿主細胞;重組載體,其位于宿主細胞內(nèi),重組載體包括載體以及插入載體內(nèi)的啟動子,其中,14種全細胞生物傳感器內(nèi)的啟動子分別是recAp、dnaKp、grpEp、katGp、fabAp、yibTp、soxSp、glgSp、oxyRp、uvrAp、ompFp、spyp、pspAp和leuAp,以及全細胞生物傳感器陣列的應(yīng)用,本發(fā)明無需樣品預(yù)處理能夠通過監(jiān)測食品原材料的頂空有機揮發(fā)物組分來指示霉變狀態(tài),成本低、準確度高以及操作便利。
本發(fā)明授權(quán)全細胞生物傳感器陣列及其應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了:1.全細胞生物傳感器陣列的構(gòu)建方法,其特征在于,包括以下步驟: S1、獲取宿主細胞與重組載體,采用轉(zhuǎn)化法將所述重組載體轉(zhuǎn)化進入所述宿主細胞內(nèi),獲取14種全細胞生物傳感器:所述14種全細胞生物傳感器內(nèi)的啟動子分別是recAp、dnaKp、grpEp、katGp、fabAp、yibTp、soxSp、glgSp、oxyRp、uvrAp、ompFp、spyp、pspAp和leuAp, 根據(jù)大腸桿菌的啟動子數(shù)據(jù)庫的啟動子序列,分別設(shè)計14個啟動子區(qū)域的擴增引物,從大腸桿菌DH5α的基因組DNA中擴增出包含啟動子的DNA片段, 利用限制性內(nèi)切酶BamHI和PmeI雙酶切包含啟動子的擴增片段和帶有發(fā)光桿菌Photorhabdusluminescens熒光素酶操縱子和氨芐青霉素抗性的骨架質(zhì)粒pGEN-luxCDABE,且經(jīng)瓊脂糖凝膠切膠回收和純化后,通過T4-DNA連接酶連接雙酶切后的質(zhì)粒和啟動子片段,構(gòu)建出啟動子-細菌熒光素酶的重組質(zhì)粒,最后利用熱激法把重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入DH5α的感受態(tài)大腸桿菌中,構(gòu)建成14株基于啟動子-細菌熒光素酶重組質(zhì)粒的全細胞生物傳感器, 其中,啟動子dnaKp以SEQIDNO:1和2所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子fabAp以SEQIDNO:3和4所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子glgSp以SEQIDNO:5和6所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子grpEp以SEQIDNO:7和8所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子katGp以SEQIDNO:9和10所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子leuAp以SEQIDNO:11和12所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子ompFp以SEQIDNO:13和14所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子oxyRp以SEQIDNO:15和16所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子pspAp以SEQIDNO:17和18所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子recAp以SEQIDNO:19和20所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子soxSp以SEQIDNO:21和22所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子spyp以SEQIDNO:23和24所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子uvrAp以SEQIDNO:25和26所示的堿基序列為擴增引物, 啟動子yibTp以SEQIDNO:27和28所示的堿基序列為擴增引物; S2、將每種全細胞傳感器制成海藻酸鈣凝膠微球,然后放置到96孔板上,每種全細胞傳感器的數(shù)量為3-4個,獲得全細胞傳感器陣列。
如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢?quán)人中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,其通訊地址為:100193 北京市海淀區(qū)圓明園西路2號院;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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