青島農業大學王忠獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉青島農業大學申請的專利一種細胞膜透性Δ電導率量化檢測方法及電導率檢測儀獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN118275503B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-26發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202410413234.2,技術領域涉及:G01N27/06;該發明授權一種細胞膜透性Δ電導率量化檢測方法及電導率檢測儀是由王忠;侯曉敏;楊洪兵;楊帆;陳亦凡設計研發完成,并于2024-04-08向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種細胞膜透性Δ電導率量化檢測方法及電導率檢測儀在說明書摘要公布了:本發明涉及細胞膜透性檢測技術領域,具體涉及一種細胞膜透性Δ電導率量化檢測方法,通過對小麥兩葉一芯期第1片子葉與第2片子葉的細胞膜透性進行研究發現,細胞膜完整的細胞,電解質跨膜轉運的量在特定時段內是線性的,通過各個參數檢測并計算此時段外滲液電導率變化情況,能夠準確反映細胞膜透性能力,其結果的可重復性及可靠性均能達到量化研究的標準,即實現對細胞膜透性的定量檢測;驗證并總結出Δ電導率法對細胞膜透性進行檢測,尤其適用于植物類細胞膜透性的定性和定量檢測。同時Δ電導率法在大型真菌、細菌微生物中細胞膜透性的量化檢測具有應用前景。本申請提供了專用電導率檢測儀,實現自動檢測,避免人工操作誤差,檢測效率高。
本發明授權一種細胞膜透性Δ電導率量化檢測方法及電導率檢測儀在權利要求書中公布了:1.一種細胞膜透性Δ電導率量化檢測方法,其特征在于,包括以下步驟: 步驟一,樣品選擇;選擇植物類樣本作為細胞膜透性檢測樣品備用; 步驟二,電導率數據檢測與采集;對步驟一中選擇的樣品進行多次培育得到多個檢測樣品作為生物學重復,對同一檢測樣品進行多次電導率檢測作為技術重復,并將多個檢測樣品的多次電導率數據進行采集; 步驟三,細胞膜透性檢測;基于細胞膜完整的細胞,采用Δ電導率法對細胞膜透性進行定性和定量檢測;所述細胞膜透性單位定義為:細胞膜完整的1g生物量在特定壓力下于1L純水中1h細胞外滲溶液的電導率值,計算公式為:Q(壓力值)=;其中,Δ電導率值=σ末-σ始;溶液體積為檢測的溶液體積,不含樣品體積;生物量=樣品干重=樣品濕重×干濕重比;完整率=;Δ用時=σ末用時-σ始用時; 所述細胞膜透性的檢測方法,包括以下步驟: S1,確定檢測時間間隔;以測得電導率發生明顯變化為原則連續檢測,出現第一個最高峰值總用時的150至1100之間選擇檢測時間間隔; S2,確定Δ用時;選取σ始和σ末點,以時間為X軸,導電率為Y軸,繪制散點圖,從第1個點開始,至少選取6個連續的點,添加線性趨勢線,顯示R2;若R2<0.99,則從第1個點開始依次去掉n個點直至R2≥0.99,保留的點不得少于6個,保留的第1個點記為σ始點,最后的點記為σ末點;從開始檢測到σ始點總用時記為σ始用時,從開始檢測到σ末點總用時記為σ末用時;Δ用時=σ末用時-σ始用時; S3,確定生物量;選取部分樣品作為Δ電導率法細胞膜透性檢測的樣品,剩余部分樣品烘干至恒重,計算干濕重比;生物量=樣品干重=樣品濕重×干濕重比; S4,確定細胞膜完整率;采用臺盼藍法或FDA熒光染色法對經過細胞膜透性檢測后樣品的細胞膜完整率進行檢測,計算得到細胞膜完整率。
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